二、两种结果与分析
1、甜叶两种甜叶菊废渣提取物中主要成分的菊废含量
按照甜叶菊废渣提取物的主要成分为咖啡酸、绿原酸、渣提隐绿原酸、取物异绿原酸A、两种异绿原酸B、甜叶异绿原酸C、菊废槲皮素和槲皮苷。渣提采用HPLC法对两种甜叶菊废渣提取物中的取物主要成分进行定量分析。高效液相色谱条件为:AgilentEclipsePlusC18色谱柱(50mm×2.1mm,两种1.8μm),甜叶流动相为0.1%甲酸(A)和甲醇(B),菊废流速0.1mL/min。渣提洗脱程序:0~10min,取物10%~50%(B);10~12min,50%~10%(B);12~15min,10%(B)。检测波长320nm和360nm,柱温30℃,进样量1μL。采用咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、槲皮素和槲皮苷为标准品,按上述色谱条件分别测定。以标准品的质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制HPLC标准曲线,并测定两种甜叶菊废渣提取物中各主要成分的含量,通过与标准品出峰时间相比较,从甜叶菊废渣提取物中分离并检测到了6种酚酸(320nm)和2种黄酮(360nm),如图1所示。采用外标法对上述8种主要成分含量进行测定,结果见表2。样品1中总酚酸的含量为(472.01±2.28)mg/g,总黄酮的含量为(75.27±1.37)mg/g,其中含量最高的3种成分依次为异绿原酸C(158.91±1.00)mg/g、异绿原酸B(116.39±0.57)mg/g和咖啡酸(105.67±0.37)mg/g。样品2中总酚酸的含量为(424.41±5.01)mg/g,总黄酮的含量为(46.4±2.36)mg/g,其中含量最高的3种成分依次为咖啡酸(146.47±1.68)mg/g、异绿原酸C(88.73±1.05)mg/g和异绿原酸B(67.38±0.82)mg/g。从结果中看出,两种甜叶菊废渣提取物都富含酚酸和黄酮类化合物,其中,样品1中酚酸和黄酮类化合物的总量均大于样品2,且两种样品各组成成分含量之间也存在差异,样品1绿原酸类化合物含量较多,样品2咖啡酸含量较多。这些成分具有多种生物活性,如清除自由基,抗氧化,抗炎症,抗衰老等。因此对甜叶菊废渣提取物进行研究,可为其进一步开发应用提供依据。
2、两种甜叶菊废渣提取物对D-半乳糖致衰老小鼠血清抗氧化指标的影响
由图2可知,D-半乳糖组小鼠的血清SOD和GPx活力明显低于正常组(P<0.05),MDA含量明显高于正常对照组(P<0.05),表明经D-半乳糖诱导,小鼠血清内的抗氧化活性下降,脂质过氧化物明显增多。两种甜叶菊废渣提取物低剂量组小鼠血清SOD和GPx活力,MDA含量与D-半乳糖组相比均无显著性差异(P>0.05);两种甜叶菊废渣提取物的中剂量组小鼠血清GPx活力较D-半乳糖组分别显著增加了16.39%和11.88%(P<0.05),而小鼠血清SOD活力和MDA含量与D-半乳糖组相比均无显著性差异(P>0.05);两种甜叶菊废渣提取物高剂量组能够使D-半乳糖处理的小鼠血清SOD和GPx活力升高,MDA含量降低,其中样品1高剂量组SOD和GPx活力分别显著增加10.32%和21.67%(P<0.05),MDA含量降低了24.5%(P<0.05),样品2高剂量组SOD和GPx活力分别显著增加11.28%和17.42%,MDA含量降低了24.8%(P<0.05)。两种甜叶菊废渣提取物之间相比,对D-半乳糖处理小鼠血清抗氧化指标(SOD,GPx和MDA)的影响无显著性差异(P>0.05)。综合以上结果表明,两种甜叶菊废渣提取物有助于D半乳糖诱导衰老小鼠清除血清脂质过氧化物,提高血清抗氧化酶活力,增强机体免疫系统的能力。
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